Contenido de agua de un liofilizado: Karl Fischer
El contenido de agua es la fracción del polvo liofilizado que corresponde a agua residual, expresada como porcentaje en peso. Se mide por titulación de Karl Fischer, un método específico para el agua.
La liofilización retira casi toda el agua, pero no toda, y muchos péptidos son higroscópicos: absorben humedad del aire en cuanto se abre el vial. La titulación de Karl Fischer reacciona de forma específica con el agua; en su versión coulométrica genera el reactivo por electrólisis y detecta cantidades muy pequeñas.
Los certificados publicados en el sitio fijan un máximo de 5.0 % en peso; un lote de MOTS-c tuvo 2.6 %. Como el contraión, el agua forma parte del peso bruto y es una de las razones por las que el polvo pesado no equivale a péptido puro.
El agua también favorece la degradación: la hidrólisis de enlaces y la desamidación avanzan más rápido en un sólido húmedo.
Contenido de agua y manejo del vial
Explica la indicación de dejar que el vial frío alcance la temperatura del laboratorio antes de abrirlo: si se abre frío, la humedad del aire se condensa sobre el polvo y sube su contenido de agua.
Términos relacionados
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