Endotoxinas: qué son y por qué se miden en un péptido
Las endotoxinas son lipopolisacáridos (LPS) de la membrana externa de las bacterias gramnegativas. Se liberan cuando la bacteria muere, resisten el calor y la esterilización convencional, y se miden en unidades de endotoxina (EU) con la prueba del lisado de amebocitos de Limulus (LAL).
El LPS está formado por un lípido A, responsable de la actividad biológica, unido a una cadena de azúcares. En mamíferos lo reconoce el receptor TLR4 de macrófagos y otras células inmunes, que responden con citocinas inflamatorias aun a concentraciones muy bajas.
La prueba LAL aprovecha que la sangre del cangrejo herradura coagula en presencia de endotoxina. En la versión cromogénica cinética, la reacción libera un compuesto de color y la velocidad con la que aparece indica la cantidad. Los certificados publicados en el sitio fijan un máximo de 1.0 EU/mg, y en un lote de MOTS-c el resultado fue menor de 0.05 EU/mg.
Una solución puede ser estéril y contener endotoxinas: la filtración retira bacterias, pero no todo el LPS que ya liberaron.
Endotoxinas en ensayos de inflamación
En experimentos que miden inflamación, citocinas o activación de macrófagos, una contaminación con endotoxina produce exactamente la señal que se busca medir. Es un control crítico en compuestos estudiados en inflamación, como KPV o BPC-157.
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