Disolventes residuales: qué son y cómo se miden
Los disolventes residuales son restos de los líquidos orgánicos usados en la síntesis y la purificación que quedan en el producto final. Se miden por cromatografía de gases con muestreo del espacio de cabeza (headspace).
La síntesis de péptidos en fase sólida usa disolventes como dimetilformamida y diclorometano; la purificación por HPLC usa acetonitrilo, y la precipitación del péptido crudo suele hacerse con éter. La liofilización elimina la mayor parte, pero puede quedar una fracción.
En la técnica de headspace se calienta la muestra en un vial cerrado y se inyecta al cromatógrafo sólo el vapor, donde están los compuestos volátiles. Los límites siguen la clasificación internacional de disolventes por toxicidad: unos pocos de clase 1 se evitan, los de clase 2 tienen límites específicos y los de clase 3, de menor toxicidad, se aceptan hasta 5,000 ppm (0.5 %) sin justificación adicional.
Los certificados del sitio usan ese máximo de 5,000 ppm; un lote de MOTS-c tuvo 219 ppm.
Disolventes residuales en un ensayo celular
Un disolvente residual puede ser tóxico para células en cultivo o interferir en un ensayo enzimático. Su valor permite descartar esa fuente de variación antes de atribuir un efecto al péptido.
Términos relacionados
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