Espectrometría de masas: qué es y qué confirma en un péptido
La espectrometría de masas es una técnica que convierte moléculas en iones y los separa por su relación masa/carga (m/z). En un péptido sirve para comprobar que la masa observada coincide con la que predice su secuencia, es decir, para confirmar su identidad.
El equipo tiene tres partes: una fuente que ioniza la muestra, un analizador que separa los iones y un detector. En péptidos predominan dos fuentes. La ionización por electrospray (ESI) produce iones con varias cargas y se acopla con facilidad a una cromatografía líquida, lo que se conoce como LC-MS. MALDI ioniza la muestra desde una matriz cristalina con un láser y suele dar iones de una sola carga.
Un analizador de alta resolución mide la masa con un error de pocas partes por millón (ppm). A esa exactitud, la masa observada distingue la fórmula esperada de muchas alternativas con masa nominal parecida. Si además se fragmenta el ion (MS/MS), los fragmentos permiten leer la secuencia residuo por residuo.
La técnica tiene límites claros. No distingue moléculas con la misma fórmula, como un residuo L frente a su forma D o dos secuencias con los mismos aminoácidos en otro orden, y la intensidad de una señal no equivale a su proporción en la muestra. Por eso la pureza se mide aparte, por cromatografía.
Qué confirma la espectrometría de masas en un certificado
En un certificado, la espectrometría de masas responde si el vial contiene la molécula declarada; la HPLC responde qué proporción del material detectado es esa molécula. Un lote necesita las dos respuestas.
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